埃希氏菌通用PCR检测试剂盒厂家

原理是由一对引物介导，能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增，经过n个热循环扩增，扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0＜E＜1,扩增效率＝倍，使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。
 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；

注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

​
实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术原理：
 DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链，在DNA聚合酶与启动子的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。
       在聚合酶链式反应实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，并设计引物做启动子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。（ DNA高温变性低温复性）
       发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义，该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活，不需要每个循环加酶，使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本，PCR技术得以大量应用，并逐步应用于临床。

人前列腺上皮细胞*培养基大肠杆菌 Escherichia coli

RWPE1(人前列腺上皮细胞)5×106cells/瓶×2

酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂/YPD琼脂/YEPD琼脂/Yeast Extract Peptone Dextrose Agar生物制品和蜜浆制剂酵母菌总数测定250克国产/进口

沼泽红假单胞菌 Rhodosedoseudomouas padustris香菇 Lentinula edodes

无菌豚鼠血清/Sterile Defidrinated Guinea pig BloodBR200毫升国产/进口

波形蛋白(VIM)重组蛋白英文名称：Recombinant Vimentin (VIM)

曲霉 Aspergillus niger动物双歧杆菌 Bifidobacterium animalis

苜蓿中华瘤菌 Sinorhizobium meliloti链霉菌 Streptomyces sp.

小鼠肾小管平滑肌细胞*培养基100mL

人滑膜细胞*培养基100mL

人角膜成纤维细胞*培养基100mL

埃希氏菌通用PCR检测试剂盒厂家4--3,5-二溴吡  251.91  4- amino -3,5- dibromopyridine*：84539-34-4分子量： C5H4Br2N2

2-巯-4-噻唑  193.29  2- mercapto -4- phenylthiazole*：2103-88-0分子量： C9H7NS2

2,4,5-三咪唑  445.77  2,4,5- three*：1746-25-4分子量： C3HI3N2

2,9-二溴-1,10-菲咯啉    2,9- dibromo -1,10- Phenanthroline*：39069-02-8分子量：

α,α'-二(4-羟)-1,4-二异丙  346.47  Alpha, alpha '- two (4- hydroxyphenyl) -1,4- two isopropyl benzene*：2167-51-3分子量： C24H26O2

环氧丙烷  Epoxy propane  58.08分子量： C3H6O*：75-56-9

二氯酞菁硅  Two chloride  611.52分子量： C32H16Cl2N8Si*：19333-10-9

5-羧酸-3-吡甲酸乙酯  195.17206  5- carboxylic acid -3-*：分子量： C9H9NO4

4-(2-羟乙氧)砜  338.37  4- (2- hydroxy group B) phenyl group*：27205-03-4分子量： C16H18O6S

二甲硝咪唑-D3    Two a -D3*：64678-69-9分子量： C5D3H4N3O2

碳酸甲丙酯  118.13  Methyl propyl carbonate*：1333-41-1分子量： C5H10O3