三线镰刀菌PCR检测试剂盒说明书

技术原理：
 DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链，在DNA聚合酶与启动子的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。
       在聚合酶链式反应实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，并设计引物做启动子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。（ DNA高温变性低温复性）
       发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义，该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活，不需要每个循环加酶，使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本，PCR技术得以大量应用，并逐步应用于临床。

注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

原理是由一对引物介导，能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增，经过n个热循环扩增，扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0＜E＜1,扩增效率＝倍，使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。
 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
​
实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

蟾灵;Bufalin CAS 465-21-4 *  规格： 20mg

补骨脂二氢黄甲 ;Bavachini CAS 19879-30-2 *  规格： 20mg

白头翁皂苷B4;Anemoside B4 CAS 129741-57-7 *  规格： 20mg

阿魏酸;Ferulic acid CAS 1135-24-6 *  规格： 50mg

磺草;纯品型;标准品-甲磺草;有 CAS 104206-82-8 *  规格： 0.1g

藻醌;纯品型;标准品;有证书 CAS 2797-51-5 *  规格： 0.1g

丙;纯品型;标准品;有证书 CAS 51218-49-6 *  规格： 0.1g

丙森辛(异丙菌胺);纯品型;标准品;有证 CAS 140923-17-7 *  规格： 0.1g

瘟灵;纯品型;标准品;有证书 CAS 50512-35-1 *  规格： 0.1g

避蚊酯(邻苯二二甲酯);纯品型;标准 CAS 131-11-3 *  规格： 0.1g

烯丙;纯品型;标准品;有证书 CAS 28434-00-6 *  规格： 0.1g

果;纯品型;标准品;有证书 CAS 25954-13-6 *  规格： 0.1g

噻啉;纯品型;标准品;有证书 CAS 111988-49-9 *  规格： 0.1g

栀子苷-对照品;有报告 CAS 24512-63-8 *  规格： 20mg

糖精钠;纯品型;标准品;有证书 CAS 82385-42-0 *  规格： 0.25g

三线镰刀菌PCR检测试剂盒说明书人神经胶质瘤细胞  U251

小鼠结肠细胞  CT-26 WT

细菌筛选培养基/Bacterium Screening MediumBR100克国产/进口

卵黄钠琼脂培养基/Egg-Yolk Salt Agar金黄色葡萄球菌的选择性分离250克国产/进口

布氏菌选择性培养基/Brucella Selective Medium布氏菌的选择性分离培养250克国产/进口

CLED培养基/溴百里酚蓝糖胱氨酸琼脂/CLED Medium/BROLACIN Agar/Bromothymol-blue Lactose Cystine Agar/Cystine-Lactose-Electrolyte Deficient Agar尿液中微生物的选择性分离培养250克国产/进口

人椎间盘髓核细胞*培养基100mL

小鼠胰腺星状细胞*培养基100mL

四硫磺酸钠亮绿增菌液 规格： 2X5支 用途： 含碘液2ml/支和煌绿1ml/支，2支添加于100mL（023031）中配成TTB

SCDLP液体培养基 规格： 250g 用途： 用于疏水性化妆品样品处理及化妆品和一次性使用卫生用品增菌培养(化妆品卫生规范微生物检验方法2...

Toll样受体2(TLR2)重组蛋白  Recombinant Toll Like Receptor 2 (TLR2)

脯氨酸/丝氨酸丰富卷螺旋蛋白1(PSRC1)重组蛋白  Recombinant Proline/Serine Rich Coiled Coil protein 1 (PSRC1)

粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GMCSF)重组蛋白  Recombinant Colony Stimulating Factor 2, Granulocyte Macrophage (GMCSF)

无翅型MMTV整合位点家族成员3(WNT3)重组蛋白  Recombinant Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 3 (WNT3)

ACHN(人肾细胞)5×106cells/瓶×2

S-180(小鼠瘤细胞)5×106cells/瓶×2