梭状芽孢杆菌属通用PCR检测试剂盒厂家

注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

原理是由一对引物介导，能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增，经过n个热循环扩增，扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0＜E＜1,扩增效率＝倍，使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。
 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
​
实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

乙酚红琼脂/Acetamide Agar250克国产/进口

苜蓿中华瘤菌 Sinorhizobium meliloti许旺酵母 Schwanniomyces occidentalis

硫酸十二烷基钠琼脂鼠疫杆菌抗噬菌体培养250克国产/进口

Caki-1, 人肾透细胞皮肤转移细胞旺兹沃思沙门氏菌 Salmonella wandsworth

中分子量蛋白Marker苏云金芽孢杆菌 Bacillus thuringiensis

鳞状细胞抗原2(SCCA2)重组蛋白英文名称：Recombinant Squamous Cell Carcinoma Antigen 2 (SCCA2)

明胶培养基(营养明胶) 规格： 100g 用途： 供测定细菌化明胶使用(GB15979-2002和GB/T4789.28－2003 中3.10，GB/T4789.35－2003)。

毛柄金钱菌(金针菇) Flammulina velutipes酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

K562全细胞裂解100μg100μg

类布氏杆菌 Lactobacillus parabuchneriHepG2/肝细胞

J774A.1(小鼠单核巨噬细胞)5×106cells/瓶×2

梭状芽孢杆菌属通用PCR检测试剂盒厂家酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂/YPD琼脂/YEPD琼脂/Yeast Extract Peptone Dextrose Agar生物制品和蜜浆制剂酵母菌总数测定250克国产/进口

SD-39琼脂/SD-39 Agar滤膜法大肠杆菌O157的分离培养250克国产/进口

1% NaC1纤维二糖发酵管BR20支国产/进口

大鼠淋巴成纤维细胞*培养基100mL

小鼠胎儿表皮角质形成层细胞*培养基100mL

乙酰胺培养基 规格： 100g 用途： 用于革兰氏性非发酵菌特别是绿脓杆菌的选择性分离培养(化妆品卫生规范微生物检验方法2007版)。

3%钠三糖铁琼脂 规格： 250g 用途： 用于副溶血性弧菌的生化反应。(GB、SN)

白血病抑制因子(LIF)重组蛋白  Recombinant Leukemia Inhibitory Factor (LIF)

含卷螺旋域蛋白3(CCDC3)重组蛋白  Recombinant Coiled Coil Domain Containing Protein 3 (CCDC3)

趋化因子C-C-基元配体3样蛋白1(CCL3L1)重组蛋白  Recombinant Chemokine C-C-Motif Ligand 3 Like Protein 1 (CCL3L1)

血红素氧合酶2(HO2)重组蛋白  Recombinant Heme Oxygenase 2, Decycling (HO2)

FRhK-4(恒河猴胚肾细胞)5×106cells/瓶×2

CAL-27(人舌鳞细胞)5×106cells/瓶×2

RTE(大鼠气管上皮细胞)5×106cells/瓶×2

人眼脉络黑色素瘤细胞  MuM－2C

小鼠肝细胞  Hepa 1-6

技术原理：
 DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链，在DNA聚合酶与启动子的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。
       在聚合酶链式反应实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，并设计引物做启动子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。（ DNA高温变性低温复性）
       发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义，该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活，不需要每个循环加酶，使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本，PCR技术得以大量应用，并逐步应用于临床。