鸡传染性贫血病毒PCR检测试剂盒说明书

技术原理：
 DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链，在DNA聚合酶与启动子的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。
       在聚合酶链式反应实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，并设计引物做启动子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。（ DNA高温变性低温复性）
       发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义，该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活，不需要每个循环加酶，使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本，PCR技术得以大量应用，并逐步应用于临床。

注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

原理是由一对引物介导，能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增，经过n个热循环扩增，扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0＜E＜1,扩增效率＝倍，使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。
 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
​
实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

8-氧黄连碱 CAS  *  规格： HPLC≥98%;20mg

小檗红碱酸酯 CAS  *  规格： HPLC≥98%;20mg

松柏醛 CAS 458-36-6 *  规格： HPLC≥98%;20mg

人参皂苷Rk3 CAS 364779-15-7 *  规格： HPLC≥98%;20mg

7－羟基马兜铃酸A CAS 79185-75-4 *  规格： HPLC≥98%;10mg

醉椒苫素 CAS 20697-20-5 *  规格： HPLC≥98%;10mg

杠柳苷 CAS 13137-64-9 *  规格： HPLC≥98%;20mg

华蟾它灵 CAS 1108-68-5 *  规格： HPLC≥98%;20mg

二氢石蒜碱 CAS 6271-21-2 *  规格： HPLC≥98%;20mg

次大风子素 CAS 51419-48-8 *  规格： HPLC≥98%;10mg

Α-波菜甾醇 CAS 481-18-5 *  规格： HPLC≥98%;20mg

(+)素-β-D-吡喃葡萄糖苷 CAS 69251-96-3 *  规格： HPLC≥98%;20mg

3,5-二-O-啡酰奎宁酸 CAS 89919-62-0 *  规格： HPLC≥98%;20mg

法卡林二醇 CAS 55297-87-5 *  规格： HPLC≥98%;10mg

柯里拉京 CAS 23094-69-1 *  规格： HPLC≥98%;20mg

鸡传染性贫血病毒PCR检测试剂盒说明书CHO(仓鼠卵巢细胞)人胰腺星状细胞*培养基

酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae人前列腺成纤维细胞*培养基

小单孢菌 Micromonospora sp.酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

人尿道上皮细胞*培养基刺孢吸水链霉菌北京变种 Streptomyces hygrospinosus

RSC, 大鼠雪旺细胞F9(小鼠畸胎瘤细胞)

酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

蜡蚧轮枝菌 Verticillum lecanii好食脉孢菌

AllIP/Co-IP Kit(Rabbit/Human/Rat)通用型免疫沉淀试剂盒(兔/人/大鼠)人腺细胞

酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiaehDPSCs, 人前磨牙牙髓干细胞

金龟子绿僵菌小孢变种 Metarhizium anisopliae var. anisopliae酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

人肺腺细胞巨大芽胞杆菌 Bacillus megaterium

MGC80-3（MGC-803）人胃细胞胰蛋白酶-EDTA(含10mL 酶解缓冲液)

鼠李糖杆菌 Lactobacillus rhamnosus椭圆酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae var.ellipsoideus

苏云金芽孢杆菌 Bacillus thuringiensis泛酸枝芽胞杆菌 Virgibacillus pantothenticus

RS1(大鼠皮肤成纤维样细胞)BSA标准梯度浓度试剂盒(即用型)-兔IgG

荧光假单胞菌 Pseudomonas fluorescens地衣芽孢杆菌 Bacillus licheniformis